肺炎支原体IgG抗体试剂盒操作说明书
本试剂采用固相酶联免疫ELISA原理,定性检测人血清中的肺炎支原体IgG抗体
一.试剂盒内容:
1. 抗原包被板
12×8
孔
6.底物A液
6 ml/支
2. 阳性对照血清 1
ml/支
7.底物B液
6 ml/支
3. 阴性对照血清 1
ml/支
8.浓缩洗涤液(25X) 40ml/支
4. 样本稀释液(10X) 20ml/支
9.终止液
6 ml/支
5. IgG酶联物
11ml/支
二.操作步骤:
1. 先将试剂盒平衡至室温, 约15分钟.
2. 配制应用洗涤液: 浓缩洗涤液用蒸馏水1:25稀释(1瓶浓缩洗涤液加960ml蒸馏水).
3. 配制样本稀释液: 将样本稀释液用蒸馏水按1:10稀释.
4. 待测样本用样本稀释液1:500稀释.
5. 加100ul阳性.阴性对照血清及处理的待测样本于相应孔中,空白对照孔加100ul应用洗涤液.
6. 37℃温育30分钟.
7. 甩去孔中液体,每孔加300ul洗涤液洗涤五次,每次两分钟,每次均需拍干.
8. 每孔加酶联物二滴
9. 37℃温育30分钟.
10.甩去孔中液体,每孔加入300ul洗涤液洗涤五次,每次两分钟,每次均需拍干.
11.每孔加底物A.B液各一滴,混匀.
12.37℃温育15分钟.
13.目测或加一滴终止液.60分钟内于450nm波长读取吸光度(OD值).以空白对照孔调零.
三.结果判断:
1.目测
待测样品孔显蓝色,可判断为阳性;
待测样品孔不显色或显色低于阴性对照孔可判断为阴性.
2.用OD值判断:
⑴
计算临界值(CUT OFF 值)
临界值=2.1×阴性对照OD值
⑵
结果判断:
阳性:样本OD值>
临检值
阴性:样本OD值≤阴性对照OD值
可疑样本:阴性对照OD值<样本OD值≤临界值
⑶当阴性对照血清OD值低于0.100时,按0.100计算.
四.注意事项:
1. 2-8℃有效期半年.
2.不同批号试剂不可混用,批号见里盒面.
3.试剂盒不宜冻结贮存.
4.样本最好为新鲜采集,不可有溶血.脂血或混浊,如需保存,可于2-8℃ 冷藏1周或低温长期冷冻, 避免样本反复冻融.
注: 该中文说明书仅作参考!