PCR检测乙肝毒(HBV)试剂盒说明书
(20人份/套)
-20摄氏度贮存,半年有效
一,
试剂成分:
HBV-PCR反应液
400ul(20ul/次)
Taq酶(1u/ul)20ul(1ul/次)
HBV-DNA
裂解液
600ul(20ul/次)
阳性模板10ul(2ul/次)
二,
标本处理:
取混匀的血清20ul加20ul裂解液,搅匀后100摄氏度沸水浴10分钟,最后15000rpm/3分钟离心,取4ul上清待检。
三,加样及PCR:
HBV-PCR反应液
20ul
Taq酶(1u/ul)
1ul
待检标本
4ul
混匀后稍加离心,滴入2滴消毒液体石蜡油,置94摄氏度预变性2分钟,再按94摄氏度每30秒,55摄氏度每30秒,72摄氏度每60秒扩增35个循环。
四,
电泳与结果判断:
取15ul反应液,经2%琼脂糖凝胶电泳(5v/cm)30分钟后,在紫外灯下观察结果。如451bp处出现橙黄色条带,则HBV为阳性。
(注1):实验时,可按所做管数,将反应液与酶加在一支0.5ml管内,混匀后按每管20ul分成若干管。这样可保证各管中反应体系的匀一性和酶的准确吸取。
(注2):反应管中加好所有的试剂后,应立即上机扩增,以免形成过多的二聚体。
(注3):阳性模板可用阳性血清代替,处理方法同上。
PCR检测乙肝病毒简介
乙肝病毒(HBV)感染引起的乙型肝炎,严重危害我国人民的健康。HBV与肝硬化,原发性肝癌关系密切,因此,HBV的诊断与防治极为重要。传统的血清学方法在乙型肝炎的诊断上发挥了重要的作用。然而,在众多的乙型患者中,约有60%为慢性肝炎患者,慢性肝炎对生命的威胁远高于急性肝炎。慢性肝炎患者的血清学指标往往都显阴性,此时检测HBV-DNA是唯一可靠的检测指标。另外,血清学结果模棱两可或与临床表现不符时,PCR技术有助于明确诊断。
PCR检测乙肝毒(HBV)试剂盒说明书
(20人份/套)
-20摄氏度贮存,半年有效
一.
试剂成分:
HBV-PCR反应液
400ul(20ul/次)
Taq酶(1u/ul)20ul(1ul/次)
HBV-DNA
裂解液
600ul(20ul/次)
阳性模板10ul(2ul/次)
二
标本处理:
取混匀的血清20ul加20ul裂解液,搅匀后100摄氏度沸水浴10分钟,最后15000rpm/3分钟离心,取4ul上清待检。
三,加样及PCR:
HBV-PCR反应液
20ul
Taq酶(1u/ul)
1ul
待检标本
4ul
混匀后稍加离心,滴入2滴消毒液体石蜡油,置94摄氏度预变性2分钟,再按94摄氏度每30秒,55摄氏度每30秒,72摄氏度每60秒扩增35个循环。
五,
电泳与结果判断:
取15ul反应液,经2%琼脂糖凝胶电泳(5v/cm)30分钟后,在紫外灯下观察结果。如451bp处出现橙黄色条带,则HBV为阳性。
(注1):实验时,可按所做管数,将反应液与酶加在一支0.5ml管内,混匀后按每管20ul分成若干管。这样可保证各管中反应体系的匀一性和酶的准确吸取。
(注2):反应管中加好所有的试剂后,应立即上机扩增,以免形成过多的二聚体。
(注3):阳性模板可用阳性血清代替,处理方法同上。
PCR检测乙肝病毒简介
乙肝病毒(HBV)感染引起的乙型肝炎,严重危害我国人民的健康。HBV与肝硬化,原发性肝癌关系密切,因此,HBV的诊断与防治极为重要。传统的血清学方法在乙型肝炎的诊断上发挥了重要的作用。然而,在众多的乙型患者中,约有60%为慢性肝炎患者,慢性肝炎对生命的威胁远高于急性肝炎。慢性肝炎患者的血清学指标往往都显阴性,此时检测HBV-DNA是唯一可靠的检测指标。另外,血清学结果模棱两可或与临床表现不符时,PCR技术有助于明确诊断。
注: 该中文说明书仅作参考!